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500T-5mL

CCK-8在避光0~5℃的条件下存放一年，测定效果完全不变。在-20℃的条件下可以贮存更久。反复冻融会增加背景值，经常使用时请于0~5℃条件下保存。

自备材料

1. CCK-8试剂检测细胞活力，可用于细胞增殖和毒性分析，方法简便而准确。其基本原理为：该试剂中的WST–8与MTT类似，在电子载体1-甲氧基PMS的作用下，被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲臜染料（Formazan），甲臜的生成量与活细胞的数量和活力成正比，因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。

试剂的优点

2、操作省时简单 试剂即开即用，无需配制；只需一步操作，即可测定。

4、灵敏度高 灵敏度高于MTT、XTT和MTS等方法

使用方法

2、迅速加入CCK-8试剂，每孔10μl。

4、于450nm处测定OD值。

6、若使用96孔外的培养板，试剂用量等比例增减

使用注意事项

2、加入试剂速度要快，以避免试剂残留和加样速度不一所致反应时间不同造成的显色误差。有条件的情况下，建议采用多通道移液器，可以减少平行孔间的差异。为避免枪头上的残留所带来的加样误差，CCK-8试剂可在加样前用培养基稀释混匀。

4、试剂加入后培养时间根据细胞种类的不同和每孔细胞数量的多少而异。对于贴壁细胞，加入CCK-8的培养时间一般为1~4小时，但在培养30分钟左右即可取出肉眼观察显色程度（根据细胞种类而定）。与贴壁细胞相比，悬浮细胞较难显色。对于悬浮细胞，在加入CCK-8培养1~4小时后，可先从培养箱中取出，目测染色程度或用酶标仪测定决定。白细胞较难显色，因此需要较长的CCK-8反应时间或增加细胞数量（~105个细胞/孔）。若显色困难，可以将培养板放回培养箱，继续培养数小时后再确定。注意：CCK-8的最佳反应时间以具体显色的最佳时间为准。

6、若细胞培养时间较长导致培养基颜色或pH发生变化，建议更换新鲜培养基后再加入CCK-8试剂。含有酚红的培养基不影响本试剂的使用。

8、如果要测定细胞的具体数量，需要先做一个标准曲线。