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货号 PH1466

名称 Nuclear/Cytosol Fractionation Kit

规格 50T | 100T

存储 提取液 2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。有效期一年。

试剂组分

Component 50 assay 100 assay

Extract Reagent A（提取液 A） 20mL 40mL

Nuclear Store Buffer B（核保存液 B） 10mL 20mL

Protease Inhibitor Cocktail（蛋白酶抑制剂混合物） 100μL 200μL

REMARK:

1、蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。

2、如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。

产品简介

细胞核/胞浆分离试剂盒可以从哺乳动物细胞中分离细胞核和胞浆组分。此试剂盒提供了一个系统，维持核和胞浆组分是分开和完整的。优化的试剂配方和程序可以快速分离胞核和胞浆，而几乎没有交叉污染。

本试剂盒提取的胞核和胞浆组分仍保持其生化功能，适合下游分析如转录活性，RNA拼接，gel－shift 分析，报告分析，酶活性分析和 WB 等。

试剂盒以外自备试剂和仪器：

1)移液器、吸头

2)离心机及离心管

3)涡旋振荡器

4)冰箱，冰盒

注意事项

1. 本试剂盒仅供科学研究使用。

2. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

3. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

4. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

5. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

6. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。

7. 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

使用说明

1. 取 5-10×10⁶ 个细胞（细胞数量根据实验情况调整，每次的提取液用量并不是一定的，大约为细胞体积的 5-10倍即可，请根据实际情况调整），在 4℃，500×g 条件下离心 2-3 分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。

2. 用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。【注】在 4℃，500×g 条件下离心 5 分钟。

3. 在细胞沉淀中加入 400μl 冷的提取液 A，涡旋振荡混匀或吹打混匀，置冰上振荡 30 分钟。（没有振荡条件的话，也可冰上静置，中间每隔 5 分钟涡旋振荡或吹打混匀。）

4. 在 4℃，1200×g 条件下离心 5 分钟。

5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即得到胞浆组分，请置冰箱保存备用或直接用于下游实验。

6. 沉淀用 PBS 洗涤一次，然后在 4℃，2000×g 条件下离心 5 分钟，弃上清。

7. 沉淀为细胞核组分，将沉淀用 200μL 保存液 B 重悬后保存备用或直接用于下游实验。