| 产品名称 : | PH0219 | 粪便基因组DNA提取试剂盒 Stool Genomic DNA Extraction Kit |
| 产品品牌 : | 飞净 PHYGENE |
货号: PH0219
规格: 50T | 100T
保存:室温(15℃-25℃) 干燥保存,复检期 12 个月,2℃-8℃保存时间更长。
产品简介
本试剂盒适合于从各种粪便中提取微生物 DNA。试剂盒中含有对粪便中各种细菌、真菌有很好裂解效果,最大限度的保留了微生物 DNA 的多态性。
使用本试剂盒提取的 DNA 产量大、完整性好,可直接用于各种常规操作,包括酶切、PCR 、文库构建、Southern 杂交等实验。
试剂组分
试剂组分 | 50T | 100T |
RNase A | 1mL | 2×1mL |
蛋白酶K | 1mL | 2×1mL |
溶液SA | 40mL | 80mL |
溶液SB | 20mL | 40mL |
溶液SC | 30mL | 60mL |
漂洗液 | 15mL | 15mL×2 |
洗脱液 | 15mL | 30mL |
吸附柱+收集管 | 50set | 100set |
使用说明:
*使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1. 称取粪便样本 50-200mg,加入 400μL-800μL 溶液 SA,冰上放置 10min,12000g 离心 1min。
2. 弃上清,沉淀中加入 400μL 溶液 SB,20μL 10mg/ml RNA 酶 A ,20μL 10mg/ml 蛋白酶 k,涡旋 30s,65℃水浴 30-60min,期间颠倒数次,12000g 离心 2min。
3. 取上清于 1.5ml 离心管中,加入 300-600μL 溶液 SC,12000g,离心 1-2min,取上清。
4. 吸取上清至 DNA 吸附柱中,室温静置 1-2min,12000g 离心 0.5-1min(可重复一次)。
5. 倒掉收集管中的废液,在吸附柱中加入漂洗液 500ul,12000 rpm 离心 1min。 (重复一次)
6. 倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管,12000 rpm 离心 0.5-1min。
7. 拿出吸附柱在室温干燥数分钟( 因季节及气候等因素不等)。
8. 将吸附柱放入一个新的离心管中,加入 50-100ul 洗脱液(65 ℃预热),12000 rpm 离心 1min。
9. 将离心管中的液体重新加入到吸附柱中,12000 rpm 离心 1min。离心管中即为粪便微生物 DNA 溶液。
注意事项:
1、新鲜的粪便样本会得到更高的产率,不同样本在采样前应先查阅相应的最佳保存条件。
2、若溶液中出现浑浊可在 37℃水浴中溶解片刻至清澈,不会影响结果。
3、在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀,否则会堵塞吸附柱,并影响产物纯度。
4、洗脱缓冲液的体积最好不少于 50ul,体积过小会影响回收效率;建议使用试剂盒附带的洗脱缓冲液,用水洗脱也会损失部分产物;DNA 应保存在-20 ℃避免反复冻融,以防降解。
5、 液体试剂避免接触皮肤,若意外接触应立即使用大量清水冲洗。